ساخت و ارزیابی یک سازه ی dna بیان کننده ی پروتئین core ویروس هپاتیت c متصل به آنتی ژن s ویروس هپاتیت b به عنوان یک کاندید واکسن
نویسندگان
چکیده
مقدمه: با وجود این که ویروس هپاتیت c (hepatitis c virus یا hcv) یکی از عوامل مهم ایجاد کننده ی بیماری های مزمن کبدی می باشد، هنوز واکسن مناسبی برای آن تهیه نشده است. هدف از این مطالعه، ساخت یک سازه ی بیان کننده ی توالی core (aa: 1-122) ویروس هپاتیت c متصل به آنتی ژن s ویروس هپاتیت b (hbsag یا hepatitis b surface antigen) و تأیید بیان آن در سلول های یوکاریوتی بود. روش ها: در ابتدا توالی core این ویروس با استفاده از پرایمرهای دارای جایگاه برش آنزیمی bamhi/ecorv از روی وکتور pivex2.4a حاوی این ژن تکثیر شد و در وکتور pcdna3.1 حاوی hbsag خطی شده با آنزیم های مذکور کلون گردید. ارزیابی و تأیید ساختار نوترکیب به وسیله ی برش آنزیم های محدودکننده و در نهایت تعیین توالی صورت گرفت. پلاسمید ساخته شده ی نهایی (pchcore) در رده ی سلولی hek293t ترانسفکت شد و ارزیابی نهایی بیان توسط تست western blot بر روی سلول های hek293t ترانسفکت شده به وسیله ی آنتی بادی پلی کلونال آنتی hbsag موشی انجام شد. یافته ها: توالی ژن (122-1)core ویروس هپاتیت c با موفقیت تکثیر گردید و نتایج ارزیابی، برش آنزیمی و تعیین توالی تأییدکننده ی صحت ساختار نوترکیب pchcore و کلونینگ انجام شده بود. نتیجه ی western blot بیانگر انتقال موفق پلاسمید و بیان ژن هدف در سلول های یوکاریوتی بود. نتیجه گیری: با توجه به ساخت و بیان موفقیت آمیز ساختار hbs-core در سلول های یوکاریوتی و به دلیل احتمال افزایش پاسخ های ایمنی توسط آنتی ژن hbs به صورت فیوژن با پروتئین core (بر اساس تحقیقات قبلی)، سازه ی بیانی حاوی ژن core ویروس هپاتیت c متصل شده به این آنتی ژن، ممکن است باعث القای بیشتر پاسخ های ایمنی علیه پروتئین core شود و بتواند به عنوان واکسن مؤثر به منظور کنترل عفونت hcv به کار رود.
منابع مشابه
طراحی و ساخت سازه ی E2-fliC با استفاده از ژن fliC باکتری سالمونلا انتریکا و ژن E2 ویروس هپاتیت C و بیان آن در سیستم یوکاریوتی
Background and Aim: At the present time one of the strategies in vaccine design is generation of fusion proteins containing (including) immunogen of infectious agents and adjuvants. In this study design and construction of E2-fliC fragment as a vaccine candid was conducted by using fliC gene from Salmonella enterica and E2 gene from hepatitis C virus. Materials and Methods: To prepare the E2-f...
متن کاملمطالعه بیان پروتئین core+1 ویروس هپاتیت C توسط روش میکروسکوپی هم کانون
سابقه و هدف: پروتئین جدیدی تحت عنوان پروتئینF یاcore+1 شناخته شده است که توسط ژنوم ویروس هپاتیت C (HCV) کد می‌شود. عملکرد این پروتئین هنوز مشخص نشده است، اما به‌نظر می‌رسد در سیکل زندگی و بیماری‌زایی ویروس قش مهمی را داشته باشد. در این مطالعه کلون کردن و بیان ژن HCV core+1 در سیستم یوکاریوتی مورد بررسی قرار گرفت تا نقش این پروتئین در مسیرهای سیگنالینگ سلولی و مقاومت ویروس به درمان برر...
متن کاملبررسی اثر پروتئین core ویروس هپاتیت HCV) C) بر روی بیان miR-150
Background : Hepatitis C virus (HCV) is considered as one of the major pathogenic agents of chronic liver diseases. Previous studies have shown that HCV proteins can interaction with gene regulatory networks such as microRNAs. The aim of this study was to investigate the effect of HCV core protein on the expression of miR-150 in a cell culture model. Materials and Methods: Plasmids expressin...
متن کاملمطالعه بیان پروتئین core+1 ویروس هپاتیت C توسط روش میکروسکوپی هم کانون
سابقه و هدف: پروتئین جدیدی تحت عنوان پروتئینF یاcore+1 شناخته شده است که توسط ژنوم ویروس هپاتیت C (HCV) کد می‌شود. عملکرد این پروتئین هنوز مشخص نشده است، اما به‌نظر می‌رسد در سیکل زندگی و بیماری‌زایی ویروس قش مهمی را داشته باشد. در این مطالعه کلون کردن و بیان ژن HCV core+1 در سیستم یوکاریوتی مورد بررسی قرار گرفت تا نقش این پروتئین در مسیرهای سیگنالینگ سلولی و مقاومت ویروس به درمان برر...
متن کاملفراوانی آنتی بادی ویروس هپاتیت A در مبتلایان هپاتیت B و C در ایران
Background: Superinfection of hepatitis A in chronic hepatitis B and C may worsen the course of disease. This study attempted to study frequency of hepatitis A virus antibodies in patients with hepatitis B and hepatitis C. Materials and methods: 115 hepatitis C and 56 hepatitis B patients who visited the Hepatitis Association of Hamedan province during 2004-2005 were enrolled. Hepatitis A viru...
متن کاملطراحی و ساخت یک سازه ژنی نوترکیب بیان کننده پروتئین p24 ویروس لکوز گاوی در اشرشیاکلی
لکوز انزئوتیک گاوی(EBL) یک بیماری رتروویروسی است که بوسیله ویروس لکوز گاوی (BLV) ایجاد و عموماً در دامداریهای صنعتی مشاهده می‌شود. این بیماری موجب کاهش توان تولید و بروز خسارتهای اقتصادی قابل توجه در گله می‌شود. کنترل عفونتهای ناشی از BLV با انجام آزمایشهای سرولوژی، شناسایی و جداسازی یا حذف حیوانات سرم مثبت انجام میگردد. در این مطالعه، ژن پروتئین p24 از BLV پس از تکثیر توسط PCR، به پلاسمید...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
مجله دانشکده پزشکی اصفهانجلد ۳۱، شماره ۲۲۶، صفحات ۱۵۰-۱۶۰
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023